胚胎期氟暴露对斑马鱼骨骼发育的影响

作者: 李俊骏 [1] 赵巧湜 [1] 李悦 [1] 包莹 [1] 李冰洋 [2] 严画竹 [2] 霍思梦 [1] 范玉梅

关键词: 斑马鱼 氟 骨质硬化 骨质疏松

摘要:目的 研究胚胎期氟暴露对斑马鱼骨骼发育的影响.方法 将受精3 d(3 days post fertilization,3 dpf)的斑马鱼胚胎暴露于常规养鱼水(对照组,氟离子含量<0.2 mg/L)和含25、50、100 mg/L氟化钠(NaF)的养鱼水中,28℃培养5 d(8 dpf)至斑马鱼头部骨骼形成,用氟离子选择电极法检测斑马鱼胚胎整体氟含量.重新制作氟暴露模型,分别为对照(0.0 mg/L)组,低剂量暴露(0.5、1.0、4.0 mg/L)组和高剂量暴露(50.0、100.0mg/L)组,计算各组斑马鱼胚胎存活率;在40倍胚胎镜下观察斑马鱼胚胎大体形态;采用茜素红染色法对斑马鱼骨骼进行染色,显微镜下观察、数码成像后定量检测骨骼染色区域面积及累积光密度(IOD),用于分析骨质硬化和骨质疏松情况.结果对照组,25、50、100 mg/L染氟组斑马鱼胚胎整体氟含量分别为(0.32±0.01)、(0.63±0.01)、(0.86±0.02)、(1.21±0.01)μg/150条.与对照组比较,各染氟组斑马鱼胚胎整体氟含量明显增加(P均< 0.05),且有一定的剂量反应关系.重新制作氟暴露模型后,对照组和各染氟组的斑马鱼胚胎存活率分别为96.67%、96.67%、96.67%、98.33%、98.33%和98.33%,组间比较差异无统计学意义(x2=7.309,P>0.05);胚胎镜下各染氟组斑马鱼胚胎脊柱均未出现明显畸形;斑马鱼颅骨茜素红染色面积对照组为84 380.51±11 711.41,低剂量暴露(0.5、1.0、4.0 mg/L)组为92 592.16±7 143.81、92 164.85±10 136.18和95 112.26±13 721.91,均高于对照组(P均<0.05),高剂量暴露(50.0、100.0 mg/L)组为67 778.92±8 597.11和64 272.93±9 302.57,均低于对照组(P均<0.05);斑马鱼颅骨茜素红染色IOD对照组为25 094.13±6 571.86,低剂量暴露(0.5、1.0、4.0 mg/L)组为29 754.95±3 836.45、28 747.36±4 677.86和30 776.49±5 589.63,高于对照组(P均< 0.05),高剂量暴露(50.0、100.0 mg/L)组为19 263.10±4 754.72和18 202.58±4 897.15,低于对照组(P均< 0.05).结论低剂量氟暴露使斑马鱼胚胎骨质硬化,高剂量氟暴露使斑马鱼胚胎骨质疏松.


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